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玉米肽 多肽提取研究

发布时间:[2016-09-19]       返回列表

醇溶蛋白的提取:
称取一定量的玉米黄粉,按w/v为1:9的比例加入70% 的乙醇,在55℃条件下搅拌提取 2.5h,以4000r/min离心10min,收集上清液并调pH6.2,静置,再以4000r/min离心10min,得沉淀冻干即为玉米醇溶蛋白。
注:得率为22.71%:醇溶蛋白干重/玉米黄粉
提取率为44.89%:提取的醇溶蛋白干重的蛋白含量/玉米黄粉的蛋白含量
醇溶蛋白的含量:90%左右
玉米肽的制备:
称取一定量的玉米醇溶蛋白粉,按w/v为1:20的比例加水,搅拌均匀,在沸水浴中煮15min,使蛋白变性,调温度为55℃,pH9.0,加入3% 的液体碱性蛋白酶,搅拌酶解2h,期间维持pH9.0不变。酶解完毕,在沸水浴中煮15min灭酶,冷却,以4000r/min离心10min,上清液浓缩冻干,即得玉米肽。
注:水解度:23.30%:断开的肽键数占整个蛋白质分子肽键总数的比值
得率:67.95%:肽干粉/醇溶蛋白
肽回收率:90.31%:1g蛋白质酶解液的含氮量/1g蛋白质的含氮量
五肽含量:3.45%:五肽质量/干粉质量
 
玉米肽制备验证试验:
水解度:25.69%
得率:82.86% (制备量大,可能会提高其得率)
肽回收率:94.10%
五肽含量:3.33%
 

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